Karanlık Alan Mikroskopunda İnceleme

 Yazıyı pdf formatında indirmek için tıklayınız.

1. Genellikle boyanmamış örneklerin görüntülemesinde yararlıdır.
2. Havuz suyu, deniz suyu gibi sıvıların içerik incelemesinde kullanılır.
3. Hücre süspansiyonlarında hücrelerin görüntülenmesinde kullanılır. Örneğin bakteri, maya, protozoa içeren süspansiyonlar ya da yanak epitel hücreleri, kan hücreleri gibi hücre ve doku ekstreleri bu yöntemle bir ön incelemeye alınabilirler.
4. Hücre kültürlerinin incelemesinde, kültürlerde hareketliliğin belirlenmesinde kullanılır.
5. Otoradyografi uygulanmış preparatların incelemesinde kullanılır.
   Dermatolojide sifilizin farklı aşamalarında kullanılabilen karanlık saha mikroskobu, Treponema palidum’un doğrudan saptanmasını sağlayarak sifiliz tanısında en özellikli ve hızlı yöntem olmuştur. Primer, sekonder, enfeksiyoz relaps ve nemli lezyonların bulunduğu erken konjenital sifilizde tanı koydurucudur.

1. Serum fizyolojik (%0,9 NaCl)
2. Eldiven
3. Gazlı bez
4. Lam
5. Lamel
6. Karanlık saha mikroskopu
7. İmmersiyon yağı

1. Örnek, antibiyotik tedavisi başlamadan alınmalıdır.
2. Birden fazla lezyon varsa en yenisi seçilmelidir.
3. Lezyon temizse hemen, kurutlu ya da kirli ise silindikten sonra alınmalıdır. Antiseptik, antibakteriyel, sabun kullanmadan sadece serum fizyolojik emdirilmiş gazlı bez ile silme ya da dikkatli ve nazikçe kurutu kaldırma işlemi yapılır. Temizleme esnasında mümkün olduğunca az miktarda sıvı kullanılmalıdır, fazla miktarı organizmaları seyrelterek T.pallidum’un bulunmasını zorlaştırabilir. 
4. Lezyon temizlendikten sonra gazlı bezle yüzeysel olarak, çok hafif kanama odakları görene dek kazınır. Bir kaç dakika kan elemanlarının çökmesi beklenir.
5. Lezyonun tabanına ve kenarlarına lezyondan şeffaf eksuda gelene kadar hafif basınç uygulanır (lezyonun iki tarafındaki deri, her iki elin başparmağı ya da tek elin baş ve işaret parmakları kullanılarak gerilip bastırılır, sıkılmaz).
6. Şeffaf eksuda lam üzerine damlatılır. Hemen lamel ile kapatılır ve organizmalar henüz canlı iken incelenmek üzere hızla karanlık alan mikroskobuna yerleştirilir.
7. Servikal ve vajinal lezyonlarda spekulumla muayene edilerek lezyon belirlenir. Serum fizyolojik ile silinir ve gazlı ped ile hafifçe kazınır. Pastör pipeti ile alınan şeffaf eksuda lam üzerine yayılır.

1. Birkaç damla immersiyon yağı, karanlık alan mikroskopunun kondansatörü üzerine damlatılır.
2. Kondansatör yavaşça aşağıya indirilerek yağın dağılması sağlanır.
3. Preparat mikroskoba yerleştirilir ve kondansatör preparat ile iyi temas edene dek yükseltilir. Yağ içinde hava kabarcıklarının kalmamasına dikkat edilmelidir.
4. Önce 10x büyütme ile preparat odaklanır; 40x büyütme ile değerlendirilir.